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ECL 超敏化學發光液,主要用于檢測 HRP(辣根過氧化物酶)標記的目的條帶,檢測靈敏度最高可達飛克(fg)級。該發光液優化了底物的成分,應用了新型的 Enhancer 和氧化劑,發光強度更高,穩定性更好,不含有毒試劑,安全性更高。
1. 準備工作稀釋液,將 ECL 超敏化學發光液 Ultra Luminol/Enhancer Reagent (A) 和 Stabilized Peroxide Reagent (B) 按體積比例 1:1 混合;
注:為了獲得最佳效果,使用前準備稀釋液并立即使用。吸取 ECL 超敏化學發光液不同組份時要換移液管,以免污染試劑。
2. 從 TBST 或 PBST 緩沖液的托盤中取出膜,小心移去膜上的多余緩沖液,但不要讓膜干燥。
3. 將膜上有蛋白的一面朝上平整地鋪在一張紙板上,加上配好的工作稀釋液。用量以覆蓋膜為基準, 1ml 工作液可以覆蓋大約 10cm2 的膜。
4. 將膜與工作稀釋液孵育 1-5min,以確保整個表面覆蓋。
5. 通過放射自顯影膠片或成像設備獲取信號。對于一個未知的信號,可調節不同曝光的時間來獲得最佳結果。