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支原體污染是細胞培養領域的一個普遍性問題,實驗室細胞系支原體污染的平均比例為30-60%。支原體直徑約為0.1-0.3μm,且具有變形能力,可透過常見的過濾頭(0.22-0.45 μm),因此常規的過濾除菌的方法不能將其去除,細胞常用的抗生素(青霉素、鏈霉素)也對支原體無效。
支原體可通過細胞系之間交叉污染,操作人員的口腔、皮膚造成污染,或者血清等添加物而帶入污染。支原體無法通過常規的光學顯微鏡觀察到,不會引起培養基混濁,因此細胞被支原體污染一般難以察覺。
支原體會消耗必須氨基酸,影響細胞生長速率,促進代謝物積累,改變細胞形態,影響DNA、RNA以及蛋白質的合成,抑制細胞因子表達,改變被污染細胞的基因表達譜,誘導染色體畸變。我司的支原體高效清除劑能強烈的作用于感染的細胞支原體,以較低的作用濃度殺滅此污染物。不僅可用于細胞株,還可應用于敏感和易分化的細胞,如各類原代細胞、干細胞、上皮樣細胞系。本產品經過了上百種細胞的測試和長期的實驗驗證,僅12小時就可以顯著抑制支原體生長,1-2周左右即可清除支原體污染,且不影響細胞本身的代謝,完美兼具特異性和高效清除支原體的特點,且對細胞溫和無損傷,最大程度上挽救您的珍貴細胞。
1、從-20℃冰箱內取出試劑,輕輕漩渦混勻并用75%的酒精噴灑試劑管的表面,在超凈工作臺上進行無菌操作;
2、對于已檢測或懷疑有支原體污染的細胞分盤后,每10ml培養基中加入10μl Mycoplasma Elimination Reagent溶液培養7天,期間需換液時按同等比例加入。
3、連續加藥培養1周后,檢測是否還存在支原體污染。如果還存在支原體污染,可繼續培養1-2周。
注意:
1)由于不同細胞對本品的敏感度不同(大多數情況下,細胞毒性很小),使用過程中如果該產品對細胞表現出毒性或者生長變慢,可以按1:2000稀釋后使用。
2)為了發揮最好的藥效,含藥完全培養基建議現配現用,如果加藥培養基未用完,于4℃冰箱中避光保存,2周內用完,使用培養基前需預熱至37℃;
3)本產品經0.1μm過濾除菌,使用本產品時無需過濾,可直接加入培養基使用
4)支原體去除后,會有很好的預防和清除效果,但是如果環境或使用試劑中仍有污染源存在,細胞可能會再次污染,因此需做好適當的預防措施。
注意事項
1:使用本試劑前請仔細閱讀說明書;
2:規范操作,包括反應體系的配制、樣本處理及加樣等;
3:為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作;
4:本產品僅供研究使用,不得用于診斷或治療。